產品詳情
簡單介紹：
CTAB法植物基因組DNA提取試劑盒本試劑盒適用于從多種植物的不同組織中快速提取高質量的基因組DNA，特別適用于多酚、多糖含量高的植物組織和植物干粉。吸附柱中獨特的硅基質材料和相應的緩沖液能有效去除植物組織中的多糖、多酚復合物和酶抑制劑，基因組DNA在高鹽狀態下選擇性吸附于硅基質膜上，再通過快速的漂洗、離心步驟，去除其他雜質，低鹽的洗脫緩沖液將純凈的基因組 DNA 從硅基質膜上洗脫下來。使用本試劑盒提取的植物基因組 DNA，可直接進行 PCR、酶切和雜交等分子生物學實驗。
詳情介紹：
產品及特點
本試劑盒適用于從多種植物的不同組織中快速提取高質量的基因組DNA，特別適用于多酚、多糖含量高的植物組織和植物干粉。吸附柱中獨特的硅基質材料和相應的緩沖液能有效去除植物組織中的多糖、多酚復合物和酶抑制劑，基因組DNA在高鹽狀態下選擇性吸附于硅基質膜上，再通過快速的漂洗、離心步驟，去除其他雜質，低鹽的洗脫緩沖液將純凈的基因組 DNA 從硅基質膜上洗脫下來。使用本試劑盒提取的植物基因組 DNA，可直接進行 PCR、酶切和雜交等分子生物學實驗。
它具有下列特點：
它具有下列特點：
1. 簡便快速：1 小時內可獲得高純度的基因組 DNA。
2. 純度高：可直接進行 PCR、酶切和雜交等分子生物學實驗。
3. 應用廣泛，可應用于多種植物的多種組織，特別適合于多糖、多酚含量高的植物及干粉。
成分規格
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Buffer GP1 |
40ml |
80ml |
160ml |
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Buffer GP2 |
40ml |
80ml |
160ml |
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Buffer W1（concentrate） |
21ml |
42ml |
84ml |
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Buffer W2（concentrate） |
15ml |
30ml |
60ml |
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Buffer EB |
10ml |
10ml |
30ml |
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Spin Column with Collection Tubes |
50套 |
100套 |
200套 |
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室溫（15 - 25℃），可保存 12 個月 |
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本產品僅供科研使用，不得用于其它用途 |
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使用方法
（注 意：使用前在 BufferGP1 中加入β-巰基乙醇，使其終濃度為 0.2%，水浴鍋中65°C預熱）
1. 取植物新鮮組織約 100 mg 或干組織約 30 mg，加入液氮充分研磨。
（注 意：如果組織為較幼嫩部分，可不用液氮研磨，直接在研缽中加入700μl Buffer GP1 和組織一起研磨即可）
2. 將研磨后的粉末收集到一離心管（自備）中，加入700 ul 65℃預熱的Buffer GP1（使用前在預熱的 Buffer GP1 中加入β-巰基乙醇，使其終濃度為 0.2%），迅速顛倒混勻或用渦旋振蕩器充分振蕩混勻，然后將離心管置于65°C 水浴 20 min，期間每隔3 - 5 min顛倒離心管混勻樣品一次。
（注 意：如要去除 RNA，可在上述步驟完成后加入濃度為 100mg/ml 的 RNaseA 4 μl，振蕩混勻，室溫處理 5-10min）
3. 加入 700 μl 氯仿，充分混勻，12,000 rpm 離心 5 min。
（注 意：如果提取的植物材料富含多酚或淀粉，可在第 3 步驟前用酚：氯仿/1：1 進行等體積抽提）
4. 小心將上層水相轉入一新的離心管（自備）中，加入 700 μl Buffer GP2，充分混勻。將混勻后的溶液轉入離心吸附柱中，若一次不能轉移完成，可分次加入，12,000rpm離心 30 sec，棄收集管中廢液。
5. 向吸附柱內加入 500 μl 的 Buffer W1，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中廢液。
（注 意：Buffer W1 是濃縮液，按要求加入乙醇，用后及時蓋緊，以防乙醇揮發）
6. 向吸附柱內加入 500 μl 的 Buffer W2，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中廢液。
（注 意：Buffer W2 是濃縮液，按要求加入乙醇，用后及時蓋緊，以防乙醇揮發）
7. 重復步驟 7 一次。
8. 室溫 12,000 rpm 離心 2 min，甩干吸附柱上的殘留液體。（注意：此步不能省略，否則殘留乙醇會影響基因組 DNA 的后續使用）
9. 將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 塑料離心管（自備）中，加入50-100 μl Buffer EB，室溫放置 2 min。12,000 rpm 離心 2 min，離心管底溶液即基因組DNA。
（注 意：為增加洗脫效率，可將洗脫液在 50-60°C 預熱。如需使用去離子水洗脫，可用NaOH調整其pH 值在 7.0-8.5 之間，為了增加 DNA 回收率，可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置2min，再次離心收集）
